Elisa实验：竞争法测抗体的原理

　　以下是ELISA竞争法检测抗体的原理详解：

　　一、核心原理?

　　竞争法的核心在于?抗原-抗体的竞争性结合?，其反应机制为：

　　固相抗原?：预先包被在酶标板上的抗原作为固定结合位点?

　　竞争过程?：

　　样本中的待测抗体(未标记)与酶标抗体(标记抗体)同时与固定抗原结合

　　待测抗体浓度越高，结合的酶标抗体越少，显色越弱(显色强度与待测抗体浓度成反比)?

　　二、关键步骤?

　　固相抗原包被?：将抗原固定于酶标板孔内?

　　竞争孵育?：加入样本(含待测抗体)与酶标抗体混合液，孵育后形成竞争结合?

　　显色检测?：

　　结合的酶标抗体催化底物显色

　　颜色越深，说明待测抗体越少;颜色越浅，待测抗体越多?

　　三、结果判读要点?

　　现象? ?解释? ?示例?

　　样本孔显色深 待测抗体少，酶标抗体结合多 阴性样本

　　样本孔显色浅 待测抗体多，酶标抗体结合少 阳性样本

　　四、与夹心法的区别?

　　竞争法?：显色强度与待测物浓度?成反比?，适用于小分子抗原或抗体检测?

　　夹心法?：显色强度与待测物浓度?成正比?，适用于大分子抗原检测?

　　以上原理综合了抗原抗体竞争机制与显色反比关系，适用于抗体定量检测场景。

　　注：以上资料仅供参考，不作为实验依据，具体产品资料请咨询技术老师或品牌供应商。

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