Elisa实验：从洗板到结果判读指南

　　1. ?洗板操作要点?

　　洗涤液配制?：使用含0.05% Tween-20的缓冲液，确保pH中性?。

　　洗涤方法?：每孔注满洗涤液后静置1分钟，重复3-5次，最后拍干孔内残留液体?。

　　常见问题?：洗涤不津会导致高背景，过度洗涤可能降低信号强度?。

　　2. ?显色与终止反应?

　　显色控制?：TMB底物避光孵育10-15分钟，显色梯度需肉眼可见(标准品孔由浅至深)?。

　　终止时机?：显色过深(如最高浓度孔OD>2.0)需提前终止，避免非线性响应?。

　　3. ?标准曲线与结果判读?

　　曲线拟合?：优先选择四参数逻辑(4-PL)拟合，要求R2>0.99?。

　　浓度计算?：样本OD值需落在标准曲线范围内，超出时需稀释重测?。

　　质控标准?：

　　复孔CV<15%?;

　　质控品回收率80%-120%?;

　　样本稀释线性验证(回收率80%-120%)?。

　　4. ?常见异常处理?

　　高背景?：优化封闭条件(如延长封闭时间至2小时)或降低抗体浓度?。

　　无显色?：检查试剂有效期、酶标物活性及操作步骤完整性?。

　　曲线异常?：验证标准品稀释准确性及移液器精度?。

　　5. ?结果表达方式?

　　定性判定?：S/Co值≥1为阳性(S=样本OD值，Co=cut-off值)。

　　半定量?：通过抑制率(竞争法)或滴度(间接法)表示。

　　注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

　　天津本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标，天津本生，您信任的合作伙伴! 本生试剂盒