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酶联免疫吸附测定(ELISA)的核心类型与应用比较
以下是酶联免疫吸附测定(ELISA)的核心类型及应用比较,本生结合技术原理与典型场景分析:
1. 直接ELISA?
原理?:抗原直接包被于固相载体,酶标一抗直接结合显色?。
特点?:
优点?:步骤少(仅需一抗)、交叉反应风险低?。
缺点?:信号较弱,每种抗体需单独标记?。
应用?:
高丰度抗原检测(如病毒颗粒、重组蛋白)?。
细菌表面抗原(如LPS)快速筛查?。
2. 间接ELISA?
原理?:未标记一抗结合抗原后,酶标二抗放大信号?。
特点?:
优点?:信号强度提升5-10倍,适合多抗体检测?。
缺点?:步骤较多,二抗可能引发交叉反应?。
应用?:
抗体滴度测定。
自身免疫病筛查(如抗核抗体)?。
3. 夹心ELISA?
原理?:双抗体夹心结构(捕获抗体+检测抗体)?。
特点?:
优点?:灵敏度达pg/mL级,特异性强(需双表位)?。
缺点?:抗原需足够大(≥两个表位),需配对抗体?。
应用?:
微量蛋白检测(如IL-6、TNF-α)?。
肿瘤标志物定量(如CEA、PSA)?。
4. 竞争ELISA?
原理?:样本抗原与标记抗原竞争结合有限抗体,信号与浓度负相关?。
特点?:
优点?:适合小分子(半抗原),基质耐受性好?。
缺点?:信号与浓度负相关,优化复杂?。
应用?:
小分子检测(如激素、药物浓度)?。
环境污染物(如农药残留)?。
类型选择建议?
检测目标特性? ?推荐类型?
大分子抗原(>10 kDa) 直接ELISA/夹心ELISA
抗体滴度测定 间接ELISA
低丰度蛋白(pg级) 夹心ELISA
小分子(<1 kDa) 竞争ELISA
如需进一步优化实验设计,可结合样本特性与检测目标选择适配方法?。
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。
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