Elisa试剂盒标准品稀释液及样品准备

　　以下是ELISA试剂盒标准品稀释液及样品准备的规范流程和注意事项：

　　一、标准品稀释液制备?

　　稀释液选择原则?

　　血清/血浆/组织匀浆样本：使用试剂盒配套的标准品稀释液(通常含1% BSA的PBS)

　　细胞上清样本：建议用细胞培养基稀释以保持基质一致性

　　配制方法?

　　10×浓缩液按1:9比例用1× PBS(pH 7.2-7.4)稀释为工作液

　　现配现用，避免长期储存导致成分沉淀或变质

　　标准品稀释步骤：

　　二、标准品溶解与稀释?

　　溶解步骤?

　　冻干标准品离心后，沿管壁缓慢加入稀释液，静置15分钟再轻柔混匀

　　避免直接吹打，防止蛋白变性或损失

　　梯度稀释操作?

　　倍比稀释法?：每管加入等体积稀释液(如250μL)，逐级稀释(S7至S0)

　　混匀技巧?：温和颠倒5-8次或低速弹拨管底，避免涡旋

　　三、样品准备关键点?

　　样本类型? ?处理要求?

　　血清/血浆? 离心后立即分装(-20℃保存)，避免反复冻融;检测前用稀释液预稀释(通常1:2起)

　　组织匀浆? 裂解后离心取上清，用稀释液调整蛋白浓度至检测范围内

　　细胞上清? 直接检测或按需稀释(根据预估浓度)，避免含FBS干扰

　　四、注意事项?

　　钩状效应验证?：高浓度样本需梯度稀释，观察OD值是否随稀释倍数增加而升高

　　分装保存?：标准品溶解后建议分装冻存(-80℃)，避免反复冻融

　　环境控制?：稀释操作在25±2℃下进行，避免温度波动影响蛋白稳定性

　　注：具体稀释倍数需根据试剂盒说明书及预实验结果调整。

　　注：以上资料仅供参考，具体详情来咨询技术 老师或品牌供应商。

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