塑料培养皿全解析：细胞培养实验中的选择、操作与注意事项?

　　以下是塑料培养皿的正确使用方法指南，综合实验室操作规范与注意事项：

　　一、使用前准备?

　　规格选择?

　　35mm?：适合小规模实验(如干细胞克隆)，培养基用量2-3ml。

　　60mm?：通用型，培养基4-5ml，适用于常规细胞传代。

　　100mm/150mm?：需大量扩增细胞时使用，培养基8-10ml，注意开口大易污染。

　　拆封与检查?

　　一次性塑料培养皿通常预灭菌(γ射线或EO)，拆封前确认包装完好。

　　检查表面是否平整无裂纹，避免影响细胞贴附。

　　二、操作步骤?

　　无菌操作?

　　超净台内酒精擦拭台面及手套，避免手部接触皿内壁。

　　开盖时短暂灼烧皿口(若使用酒精灯)，减少空气污染。

　　培养基与细胞接种?

　　贴壁细胞：接种密度建议5×10?~1×10? cells/cm2，摇匀时采用“十字法"混匀。

　　悬浮细胞：选择低吸附处理培养皿，减少细胞损失。

　　培养环境控制?

　　CO?培养箱中倒置皿盖，防止冷凝水滴落干扰细胞生长。

　　保持水平放置，避免培养基分布不均。

　　三、使用后处理?

　　废弃规范?

　　接触生物样本的培养皿需按生物废物处理，不可随意丢弃。

　　未污染的塑料皿可高温高压灭菌(需确认材质耐温性)后丢弃。

　　重复使用(仅限可灭菌型)?

　　耐高温PP材质可121℃高压灭菌15分钟。

　　普通PS材质建议化学消毒(如75%酒精浸泡30分钟)。

　　四、常见问题解决?

　　细胞贴附差?：检查是否误用未TC处理的培养皿，或包被步骤失效。

　　边缘干涸?：培养箱湿度不足时，可在周围放置无菌水盘。

　　污染迹象?：立即终止实验，并对操作环境消毒。

　　五、注意事项?

　　避免高温变形?：PS材质培养皿不可高压灭菌或高温烘干。

　　观察记录?：选择高透明度培养皿，便于直接显微镜观察。

　　分装保存?：未使用的皿条需密封防潮，避免长时间暴露。

　　如需特定灭菌参数或细胞类型适配建议，请参考产品说明书。

　　注：以上资料仅供参考，如需特定品牌或灭菌参数，请参考产品说明书或是咨询供应品牌商。

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